影响采血卡较低验收标准的建议

国家统计局的目的是尽早识别特定疾病，以便进行症状前治 疗，从而改善临床结果。 评估血斑样本质量的所有方面以确定采血卡分析的较低验收标准非常重要。 在本研究中，我们建立了实验程序，以模拟在NBS实验室中常规接收的样品的不同质量，以评估对分析结果的影响。

我们的研究结果表明，采血卡的质量对所产生的筛选结果的可靠性具有显着影响，其程度是对于筛选的一些条件存在假阴性和假阳性结果的风险。 较重要的发现是当血点被压缩时观察到的大的负偏差。 如果受影响的个体的浓度接近截止值，则压缩导致较大的疾病被遗漏的风险。 施加压力导致20-μL血斑填充圆圈，模仿50-μL血斑的大小。 在视觉上，压缩的血斑包含苍白的中 心，在周围具有较暗的环，这在实践中难以检测。 但是，如果有证据表明存在可能的压迫，例如用于保护卡片的玻璃纸外壳上存在血液或血斑的压缩外观，则应拒绝样品。

我们证实了之前的研究结果，即体积较小的采血卡会产生较低的分析物浓度。 施加到卡上的体积越小，血液相对于更高体积的样品越远。 因此，所施加的血液体积越高，血液在冲头内的浓度就越高。 我们建议拒绝≤20μL（直径<8 mm）的样品，继发于观察到的负偏差。

我们还确认，使用外围冲头位置获得的结果通常高于来自中 心冲头位置的结果。 然而，与之前的研究相比，所有分析物的差异并无显着差异。 尽管结果不具有统计学意义，但我们建议每次检测所采取的初始冲击应来自周边位置。 如果结果高于定义的分析截止值，则应从2个不同血点的中 心位置取出重复冲头（假设血斑质量可接受）。

虽然具有统计学意义，但对于小体积或压缩血斑观察到的负偏差对于所有分析物而言并不具有临床意义。 具有经典PKU的婴儿中的苯丙氨酸浓度将显着高于筛选截止值，因此不太可能遗漏病例。 然而，这在诸如MCADD和MSUD等疾病中变得更具临床相关性，其中受影响婴儿的结果可能接近筛选临界值。 近来的一例MCADD（2种引起疾病的突变的复合杂合子，c.985A> G和c.250C> T）的C8浓度为0.55μmol/ L. 该卡包含4个填充且均匀饱和的血液圈。 如果应用本研究中观察到的负偏差，如果样品≤20μL，结果将低于筛选截止值，如果样品已被压缩，则低于分析和筛选截止值，导致假阴性案件。 此外，在CF筛查计划中，患有CF的婴儿通常具有接近筛查临界值的结果。 我们在7年期间（n = 6）审查了假阴性病例的卡片，并且在4个案例中，原因可能归因于样本不足或质量差。

过量的样品通常显示出结果的正偏差，当在第二次施用之前施加的初始血液开始干燥时，该偏差更大。 这是次要的立即双层观察到的不同扩散模式，其中来自第二次应用的血液与第 一次应用变得均匀。 因此，当样品开始干燥时，3.2毫米冲头中的血液量将是可变的。 在实践中，这些样品可能难以检测，但可能在斑点内出现较暗的环。 随着应用程序之间的间隔增加，这些环的突出性将增加。 积极的偏见可能导致假阳性病例，应该避免这种情况以防止心理社会的伤害。 但是，由于案例不会错过，我们建议接受双层样本，因为重复样本采集也会给父母带来压力和焦虑。 但是，如果将血斑样本用于诊断或监测目的，或者筛选阳性结果由结果低于指定截止值而非指定截止值以上的筛选测试，则情况不应如此，例如，筛选生物素酶缺乏症，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症和严重的联合免疫缺陷。