采血卡提取与放大WGA协议（上）

采血卡为保存少量血液提供了方便。然而，来自这些样本的基因组DNA是有限的，这可能会阻碍研究人员进行下游分析的能力。该方法提供了一种从采血卡中提取基因组DNA的简便方法。一旦dna被提取出来，它就可以使用放大协议被放大。

DNA提取

我们重新评价了GenElute™血液基因组DNA试剂盒(NA 2010)这一程序。

1.将一个采血卡(200μL斑点)切成几个2mm×2mm的碎片，然后将这些碎片放入1.5mL的微离心管中。

2.加入40μL蛋白酶K和1.0mL复悬液。

3.加入300μL的溶解液C和涡流彻底15秒。

4.在55℃下孵育10分钟。

5.孵育后，将液体(丢弃留在微离心管中的采血卡)转移到15 mL锥形管中。

6.在GenEluteMiniprep键合柱上加入500μL的柱预溶液，离心速度为12，000×g一分钟。

7.丢弃流过的液体。
注：柱制备液更大限度地将DNA与膜结合，从而使产率更加一致。

8.在15 mL锥形管中加入95%~100 %乙醇的900μL，5~10秒搅拌均匀。

9.从步骤6开始，将管道的内容转移到处理过的列中。≥6500×离心机g 一分钟。重复，直到所有的裂解液都通过该列。

10.丢弃收集管和流过.将该柱放置在一个新的2毫升收集管中。

11.加入500μL的预洗液(第 一次使用前一定要用乙醇稀释)，在≥6500×下离心1分钟。g.

12.丢弃包含流过的收集管，并将绑定柱放置到一个新的2mL收集管中。

13.在结合柱中加入500μL的洗涤液(在首 次使用前一定要用乙醇稀释)，并以较大速度(12，000-16，000×)离心。g)用3分钟来烘干装订
列。

14.将400μL的洗脱液移至柱上，在≥6500×离心机上离心1分钟。 为了逃避DNA。

15.将洗脱的dna保存在-20°C，或进入放大步骤。